液體試劑和雙試劑的優(yōu)點

液體雙試劑與其它類型試劑比較具有液體試劑和雙試劑的優(yōu)點。

（一）提高了抗干擾反應(yīng)的能力

在臨床生化測定過程中，血標(biāo)本除了含有待測物質(zhì)外，還含有各種酶、有機物、無機鹽等物質(zhì)，

這些物質(zhì)都會干擾或參與測試反應(yīng)，引起非特異性反應(yīng)干擾，而雙試劑型試劑盒設(shè)計的一個主要目

的就是為了克服這種干擾反應(yīng)。在測定過程中，首先讓試劑Ⅰ與標(biāo)本中的干擾物質(zhì)反應(yīng)，反應(yīng)  5

分鐘后，再用試劑Ⅱ啟動真正的測試反應(yīng)，從而使測定結(jié)果更加準(zhǔn)確。

例如：尿素氮的酶法測定。此測定通過二步化學(xué)反應(yīng)來完成。

在 340nm 下監(jiān)測吸光度值的變化，與同樣處理的尿素標(biāo)準(zhǔn)液比較，計算出樣品尿素含量。這

一反應(yīng)的步特異性高，脲酶只對樣品中的尿素起催化作用，但第二步反應(yīng)就存在一些干擾：樣

品中（如血清、尿液）含有 NH4，（內(nèi)源性 NH4）會消耗 NADH，使測定結(jié)果偏高；復(fù)溶試劑時所

用蒸餾水如果含有 NH4 或者所用器材不夠清潔被 NH4 污染（外源性 NH4）也會消耗 NADH，使測

定結(jié)果偏高；當(dāng)樣品中（如血清）含有較高的丙酮酸時，血清中的乳酸脫氫酶會催化下列反應(yīng)：

LDH

單一試劑型試劑測定尿素時存在內(nèi)源性 NH4、外源性 NH4 和內(nèi)源性丙酮酸的干擾，使測定結(jié)果產(chǎn)

生正誤差。

測定尿素的酶法雙試劑（液體型）試劑盒有兩個試劑，均為液體，不必復(fù)溶。試劑含α—

酮戊二酸、NADH、谷氨酸脫氫酶及維持 pH 的緩沖物質(zhì)。第二試劑含脲酶、NADH、α—酮戊二

酸。當(dāng)被檢樣品加入試劑在 37℃作用 5 分鐘，將內(nèi)源 NH4、外源性 NH4 及內(nèi)源性丙酮酸消耗 。 接 著 加 入 第 二 試 劑 使 樣 品 中 的 尿 素 被 脲 酶 水 解 成   NH4 ， 再 進 行 第 二 步 反 應(yīng) ，

GLDH

了尿素測定的準(zhǔn)確性。

再如：目前在臨床化學(xué)檢測中用的較為普遍的指示反應(yīng) Trinder 反應(yīng)（主要用于代謝產(chǎn)物的測

定，如葡萄糖、尿酸、甘油三脂、膽固醇、HDL），此指示反應(yīng)的特異性較差，受到血標(biāo)本中的膽

紅素、抗壞血酸的干擾，導(dǎo)致結(jié)果的陰性偏差。其中為了克服膽紅素的干擾，國內(nèi)外部分試劑已通

過加入鐵qing化鉀、調(diào)整顯色劑改變測定波長來排除膽紅素的干擾，而抗壞血酸的影響和干擾一直較

難克服，從面影響了測定結(jié)果。液體雙試劑（包括甘油三脂、膽固醇、HDL、尿酸、肌酐）在試

劑 I 中加入了抗壞血酸氧化酶，當(dāng)標(biāo)本和試劑 I 先反應(yīng)，便可克服標(biāo)本抗壞血酸的干擾，當(dāng)抗干擾

反應(yīng)完畢后，再加入試劑Ⅱ啟動反應(yīng)，從而使得整個反應(yīng)的特異性大大提高，準(zhǔn)確度也相應(yīng)提高。