雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸ELISA試劑盒操作步驟

雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸ELISA試劑盒操作步驟：

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

硫氧還蛋白氧化還原酶（TrxR）測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/48樣

γ-谷氨酰半胱氨酸連接酶（GCL）測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/48樣

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)活性測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/48樣

抗壞血酸（AsA）含量測(cè)試盒紫外分光光度法50管/48樣

脫氫抗壞血酸（DHA）含量測(cè)試盒紫外分光光度法50管/48樣

L-半乳糖苷-1,4-內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/48樣

抗壞血酸氧化酶（AAO）活性測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/48樣

抗壞血酸過(guò)氧化物酶（APX）測(cè)試盒紫外分光光度法50管/48樣

單脫氫抗壞血酸還原酶（MDHAR）測(cè)試盒紫外分光光度法50管/48樣

脫氫抗壞血酸還原酶（DHAR）活性測(cè)試盒紫外分光光度法50管/48樣

過(guò)氧化氫（H2O2）測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/48樣

丙二醛（MDA）測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/48樣

葡萄糖氧化酶（GOD）測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/48樣

多酚氧化酶(PPO）測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/24樣

蛋白質(zhì)羰基測(cè)試盒紫外分光光度法50管/24樣

二胺氧化酶測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/24樣

超氧陰離子測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/24樣

超氧化物歧化酶（SOD）測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法50管/48樣