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      當(dāng)前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細(xì)胞原代細(xì)胞大鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞
      大鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞

      產(chǎn)品簡介

      大鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞的相關(guān)*:細(xì)胞胰腺脂活性比色法定量檢測試劑盒 20次
      組織胰腺脂活性比色法定量檢測試劑盒 20次
      細(xì)胞肝脂活性比色法定量檢測試劑盒 20次
      組織肝脂活性比色法定量檢測試劑盒 20次
      細(xì)胞脂蛋白脂活性比色法定量檢測試劑盒 20次
      組織脂蛋白脂活性比色法定量檢測試劑盒 20次

      產(chǎn)品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-18
      廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
      訪問量:389
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      品牌其他品牌貨號GOY-01X1105
      規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
      主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

      冷凍保存細(xì)胞之方法?

      冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

      冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

      88.jpg

      產(chǎn)品屬性:   

      產(chǎn)品名稱

      規(guī)格

      貨號

      大鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞

      5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

      GOY-01X1105

      商品介紹:

      名稱    大鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞   

      2.組織來源:外周血

      3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

      4.細(xì)胞簡介:

      大鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念。內(nèi)皮祖細(xì)胞是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,亦稱為成血管細(xì)胞(Angioblast),是一群具有游走特性,能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞,缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型,不能形成管腔樣結(jié)構(gòu),其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。研究顯示,內(nèi)皮祖細(xì)胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,EPCs生物學(xué)特性和治療作用的研究成為這一領(lǐng)域新的熱點(diǎn)。

      5.方法簡介:

      實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞采用采集外周血、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

      6.質(zhì)量檢測:

      實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

      7.培養(yǎng)信息:

      包被條件PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

      培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

      產(chǎn)品貨號CM-R134

      換液頻率每2-3天換液一次

      生長特性貼壁

      細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣

      傳代特性可傳1-2代;不建議多次傳代

      消化液0.25%胰蛋白酶

      培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

       

      實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

      1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

      2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

      4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

      5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

      一、分離與培養(yǎng):

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

      5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

      二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

      2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

      5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

       Dectin-1 / CLEC7A 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

       Dectin-1 / CLEC7A 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

       FGF7 / KGF 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

       FGF7 / KGF 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

       CD209 / DC-SIGN 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

       CD209 / DC-SIGN 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

       CNTN3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

       Dkk1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

       Dkk1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽

       C2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽

      大鼠外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞0.78-50 umol/L E(Vitamin E)ELISA試劑盒

      0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Histone acetyltransferase KAT8

      0.156-10 ng/mL 人蔗糖轉(zhuǎn)運(yùn)因子SWEET1(SWEET1)ELISA試劑盒

      15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Obestatin

      0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Iduronate 2-sulfatase

      0.156-10 ng/mL 人酐Ⅸ(Carbonic anhydrase 9)ELISA試劑盒

      0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Ras GTPase-activating-like protein IQGAP1

      0.312-20 ng/mL 人細(xì)胞凋亡調(diào)整器BAX(Apoptosis regulator BAX)ELISA試劑盒

      沙門、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基(SS) 英文名稱:Salmonella-Shigella 產(chǎn)品規(guī)格:250g

      鹽緩沖液(pH7.2) 英文名稱:PBS broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g

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