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      大鼠陰莖白膜成纖維細胞

      產品簡介

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      產品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-19
      廠商性質:經銷商
      訪問量:349
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      品牌其他品牌貨號GOY-01X1413
      規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
      主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

      產品屬性: 

      產品名稱

      規格

      貨號

      大鼠陰莖白膜成纖維細胞

      5×10?Cells/T25培養瓶

      GOY-01X1413

      商品介紹:

      名稱    大鼠陰莖白膜成纖維細胞 

      2.組織來源: 陰莖白膜組織

      3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

      4.細胞簡介:

      大鼠陰莖白膜成纖維細胞分離自陰莖白膜組織;海綿體,又稱海綿體肌,是最硬的平滑肌和結締組織。海綿體是一種勃起組織,外面包有堅厚的白膜,內部由結締組織和平滑肌組成海綿狀支架,其腔隙與血管相通。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的陰莖白膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。陰莖白膜成纖維細胞(PLFs)作為牙周膜的主體細胞,是牙周膜主要的間質細胞,它不僅具有合成膠原、基質、彈力纖維和糖蛋白的功能,還有吸收膠原吞噬異物的能力,還參與了牙周組織的病變、修復及再生過程。現在,利用牙周膜細胞建立體外模型,已經成為有關員研究牙周組織疾病的重要手段。

      本公司的大鼠陰莖白膜成纖維細胞采用膠原酶-胰蛋白酶聯合消化法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶;細胞經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

      5.培養基信息:

      DMEM[H]FBS、成纖維細胞生長添加劑、PenicillinStreptomycin

      冷凍保存細胞之方法?

      冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

      冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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      實驗要點及說明:

      1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

      2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

      4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

      5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      實驗報告:

      一、分離與培養:

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

      5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

      二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

      2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

      5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

       GPR56 / TM7LN4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       RET Kinase 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      小鼠 AGRP / AgRP 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       CD93 / C1QR1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      小鼠 CD59a / MAC-IP 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      小鼠 CD79B / B29 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      小鼠 LRIG1 / LIG-1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      小鼠 CD33 / Siglec-3 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       CD93 / C1QR1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      大鼠陰莖白膜成纖維細胞白凡士林 醫用級5-羧基熒光素琥珀酰亞酯 90%Anti-DDB2/FITC  熒光素標記損傷DNA結合蛋白2抗體IgG

      黃凡士林 醫用級5(6)-羧基熒光素 95%Anti-DDC/FITC  熒光素標記多巴脫羧抗體IgG

      氫加蘭他敏 98%5(6)-羧基熒光素琥珀酰亞酯 96%Anti-DEC-205/CD205/Ly75/FITC  熒光素標記CD205抗體IgG

      2,2,6-基-4H-1,3-二噁英-4-酮 90%6-羧基熒光素琥珀酰亞酯 90%Anti-Dectin-1/CLECSF12/FITC  熒光素標記C型凝集素結構域家族7成員A抗體IgG

      Amberlite? IR-120陽離子交換樹脂 鈉型6-羧基四甲基羅丹明 for fluorescence, ≥90%Anti-Dectin-2/CLECSF10/CLEC6A/FITC  熒光素標記C型凝集素結構域家族6成員A抗體IgG

      Amberlyst® 15離子交換樹脂 濕6-羧基四甲基羅丹明琥珀酰亞酯 for fluorescenceAnti-Dectin-1/CLECSF12/RBITC  紅色熒光素羅丹明標記C型凝集素結構域家族7成員A抗體IgG

      Amberlite® XAD16非離子型大孔樹脂 20-60 mesh4,’6-二脒基-2-苯基 98%Anti-DDX4/MVH/FITC  熒光素標記DDX4抗體IgG

      Amberlite XAD7HP 離子交換樹脂 Mesh 20-60二氫羅丹明123 95%Anti-Defensin Beta1/FITC  熒光素標記防御素β1抗體IgG


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