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      小鼠下丘腦神經(jīng)元細胞

      產(chǎn)品簡介

      小鼠下丘腦神經(jīng)元細胞的相關(guān)*:小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
      小鼠上皮中性粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)免疫試劑盒*直銷
      小鼠醇脫氫(SDH)免疫試劑盒進口、組裝
      小鼠沙眼衣原體抗體IgG(CT IgG)免疫試劑盒進口、分裝
      小鼠殺傷細胞凝集素樣受體亞家族B, 成員1C(Klrb1c/Ly55c/Nkrp1c)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

      產(chǎn)品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-20
      廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
      訪問量:427
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      品牌其他品牌貨號GOY-01X1381
      規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
      主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應(yīng)用領(lǐng)域化工

      實驗要點及說明:

      1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

      2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

      4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

      5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      產(chǎn)品屬性:  

      產(chǎn)品名稱

      規(guī)格

      貨號

      小鼠下丘腦神經(jīng)元細胞

      5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

      GOY-01X1381

      商品介紹:

      名稱    小鼠下丘腦神經(jīng)元細胞  

      2.組織來源:腦組織

      3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

      4.細胞簡介:

      小鼠下丘腦神經(jīng)元細胞分離自下丘腦;下丘腦又稱丘腦下部,位于大腦腹面、丘腦的下方,是調(diào)節(jié)內(nèi)臟活動和內(nèi)分泌活動的較高級神經(jīng)中樞所在。下丘腦自前向后可分三部﹐即前部(又名視前區(qū)和視上區(qū))﹑中部(結(jié)節(jié)區(qū))和后部(乳頭體區(qū))。下丘腦具有許多細胞核團和纖維束﹐與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的其它部位具有密切的相互聯(lián)系。它不僅通過神經(jīng)和血管途徑調(diào)節(jié)腦垂體前﹑后葉激素的分泌和釋放﹐而且還參與調(diào)節(jié)自主神經(jīng)系統(tǒng)﹐如控制水鹽代謝﹑調(diào)節(jié)體溫﹑攝食﹑睡眠﹑生殖、內(nèi)臟活動以及情緒等。下丘腦神經(jīng)元與來自其他部位的神經(jīng)纖維有廣泛的突觸聯(lián)系,可以接受很多神經(jīng)沖動,為內(nèi)分泌系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的中心。它們能調(diào)節(jié)垂體前葉功能,合成神經(jīng)垂體激素及控制自主神經(jīng)和植物神經(jīng)功能。故提取下丘腦神經(jīng)元進行體外培養(yǎng),建立下丘腦神經(jīng)元體外實驗平臺具有重要意義。

      5.方法簡介:

      實驗室分離的小鼠下丘腦神經(jīng)元細胞采用胰蛋白酶消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。

      6.質(zhì)量檢測:

      實驗室分離的小鼠下丘腦神經(jīng)元細胞經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

      7.培養(yǎng)信息:

      包被條件PLL0.1mg/ml

      培養(yǎng)基含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin

      產(chǎn)品貨號CM-M242

      換液頻率每2-3天換液一次

      生長特性貼壁

      細胞形態(tài)神經(jīng)元細胞樣

      傳代特性屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

      消化液0.25%胰蛋白酶

      培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

      冷凍保存細胞之方法?

      冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

      冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

      88.jpg

      實驗報告:

      一、分離與培養(yǎng):

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

      5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

      二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

      2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

      5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

       ERP27 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       IZUMO4 / C19orf36 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       IFI30 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       CD1B / CD1A 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       SIGLEC5 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      類缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp140 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       AGER / RAGE 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       NRG1-beta 1 (ECD) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       ENPP5 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       ANGPTL4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      小鼠下丘腦神經(jīng)元細胞(R)-4-苯基-2-惡唑烷酮  98%2-二苯甲酮 98%Anti-PRL  泌乳素抗體

      L-苯氨 98%2-溴苯乙酮 98%Anti-PRL1/PTP4A1  肝再生酯1抗體

      L-苯甘氨 98%3-溴代苯乙酮 98%Anti-PRL2/PTP4A2  肝再生酯2抗體

      (S)-4-苯基-2-惡唑烷酮 98%2-氯代苯乙酮 98%(劇品)Anti-PRL3/PTP4A3  酯3蛋白抗體

      D-苯甘氨 99%2,4-二羥基苯乙酮 99%Anti-prox-1  prox-1抗體

      D-脯氨 98%3'-羥基苯乙酮 98%Anti-PH-4/P4H-TM  脯水解4抗體

      L-纈氨 97%4-羥基二苯甲酮 98%Anti-PHD3  脯羥化抗體

      D-纈氨 98%2,4,6-三羥基苯乙酮 一水合物 98%Anti-PHD2  脯羥化2抗體

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