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      小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞

      產(chǎn)品簡介

      小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的相關(guān)*:NADP濃度比色法定量檢測試劑盒 20/80次
      血清/血漿總膽汁酸連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 20次
      組織總膽汁酸連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 20次
      體液總膽汁酸連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 20次
      血清/血漿總膽汁酸循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 20次
      組織總膽汁酸循環(huán)比色法定量檢測試劑盒 20次

      產(chǎn)品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-26
      廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
      訪問量:315
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      品牌其他品牌貨號GOY-01X1071
      規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
      主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應用領(lǐng)域化工

      冷凍保存細胞之方法?

      冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

      冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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      產(chǎn)品屬性:   

      產(chǎn)品名稱

      規(guī)格

      貨號

      小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞

      5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

      GOY-01X1071

      商品介紹:

      名稱    小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞   

      2.組織來源:視網(wǎng)膜組織

      3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

      4.細胞簡介:

      小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,兩層間在病理情況下可分開,稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。第一神經(jīng)元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上,而視錐細胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節(jié)細胞,約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系,負責聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細胞層,專管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結(jié)構(gòu),它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視神經(jīng)到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),其分辨能力*。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞貼壁后呈單層排列,部分細胞聚集成團,細胞呈圓形或橢圓形,核圓且相對透明,有些細胞膜上伸出短而小的突起;該細胞為高度分化細胞,在體外屬于不增殖群。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞是青光眼病理性損害的主要細胞,視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的死亡可導致視功能不可逆損傷,研究視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞損害的細胞學和分子生物學機制有利于青光眼發(fā)病機制的研究。

      5.方法簡介:

      實驗室分離的小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法,結(jié)合視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)和化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

      6.質(zhì)量檢測:

      實驗室分離的小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

      7.培養(yǎng)信息:

      包被條件PLL0.1mg/ml

      培養(yǎng)基含B-27 SupplementPenicillinStreptomycin

      產(chǎn)品貨號CM-M122

      換液頻率每2-3天換液一次

      生長特性貼壁

      細胞形態(tài)神經(jīng)元細胞樣

      傳代特性屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

      消化液0.25%胰蛋白酶

      培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

       

      實驗要點及說明:

      1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

      2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

      4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

      5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      實驗報告:

      一、分離與培養(yǎng):

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

      5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

      二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

      2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

      5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

       TNFSF13 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

       AREG 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

       GDF2 / BMP-9 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

       AGTR-2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

       ADRB2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

       AGTR1 / AT1 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

       SHH / Sonic Hedgehog 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽

       ITGA6 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

       Galectin-8 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽

       PCSK1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

      小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞LAMVAB瓊脂 英文名稱:LAMVAB Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g

      15.6-1000 pg/mL 細小病毒(PPV)核酸檢測試劑盒

      15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Ovostatin homolog 1

      液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基(FT) 英文名稱:Thiolglycollate Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g

      0.312-20 ng/mL 人脂閥結(jié)構(gòu)蛋白-1(Flotillin-1) ELISA試劑盒

      改良麥康凱肉湯(CT-MAC) 英文名稱:Modified MacConkey Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g

      1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Fractalkine

      XLD培養(yǎng)基平板(9cm) 英文名稱:Xylose Lysine Desoxycholate Medium 產(chǎn)品規(guī)格:10個/包

      含青TSA培養(yǎng)基平板(7cm) 英文名稱:Tryptose Soya Agar 產(chǎn)品規(guī)格:10個/包

      0.156-10 ng/mL 人心肌營養(yǎng)素1(CT1)ELISA試劑盒

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