021-39921927
產(chǎn)品簡介
睪丸支持細(xì)胞的相關(guān)*：組織谷氨酰半胱合成（glutamyl systeine synthetase）活性比色法定量檢測試劑盒 20次植物谷氨酰半胱合成（glutamyl systeine synthetase）活性比色法定量檢測試劑盒 20次植物硝酸鹽還原活性比色法定量檢測試劑盒 20次真/酵母細(xì)胞硝酸鹽還原活性比色法定量檢測試劑盒 20次藻類細(xì)胞硝酸鹽還原活性比色法定量檢測
產(chǎn)品分類
| 品牌 | 其他品牌 | 貨號 | GOY-01X0913 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 睪丸支持細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0913 |
商品介紹：
名稱 睪丸支持細(xì)胞 2.組織來源：睪丸組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 人睪丸支持細(xì)胞分離自睪丸；睪丸支持細(xì)胞又稱Sertoli細(xì)胞，在體內(nèi)呈不規(guī)則的高錐體形，細(xì)胞基部附著在基膜上，頂部伸至曲精小管腔面。它是生精細(xì)胞的支架，為其提供必需的營養(yǎng)物質(zhì)，能合成與分泌雄激素結(jié)合蛋白，為其提供高濃度的雄激素環(huán)境等，還具有構(gòu)成血-睪屏障，形成睪丸內(nèi)微環(huán)境，調(diào)節(jié)發(fā)生等功能。睪丸支持細(xì)胞是睪丸的主要組成細(xì)胞，能分泌多種生長因子和免疫抑制因子，不僅可為提供營養(yǎng)支持和免疫保護(hù)，也能對其他細(xì)胞，如胰島和神經(jīng)細(xì)胞提供營養(yǎng)支持，而且當(dāng)其與胰島或神經(jīng)細(xì)胞共移植時，也能夠為這些細(xì)胞提供免疫保護(hù)，提高植活率。因此，睪丸支持細(xì)胞在細(xì)胞移植中具有廣泛的應(yīng)用前景。制備高活率的Sertoli不僅對Sertoli的基礎(chǔ)研究有重要價值，而且在發(fā)生等領(lǐng)域有重要意義。 5.方法簡介： 實(shí)驗室分離的人睪丸支持細(xì)胞采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗室分離的人睪丸支持細(xì)胞經(jīng)Fas-L免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H060 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 MBL1 基因全長ORF克隆
小鼠 B7-2 / CD86 基因全長ORF克隆
小鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 基因全長ORF克隆
小鼠 Serpinb10 基因全長ORF克隆
小鼠 CTLA4 基因全長ORF克隆
小鼠 CADM3 基因全長ORF克隆
小鼠 KNG1 轉(zhuǎn)錄變體3 基因全長ORF克隆
小鼠 JAM3 基因全長ORF克隆
小鼠 JAM2 基因全長ORF克隆
小鼠 PRLR 基因全長ORF克隆
睪丸支持細(xì)胞15.6-1000 pg/mL 人蛋白S100-A4(Protein S100-A4)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL 番茄特定基因序列(PG)核酸檢測試劑盒
0.156-10 ng/mL 人骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白2(GREM2)ELISA試劑盒
氯化鈉B肉湯基礎(chǔ)(SCPB) 英文名稱：Sodium Chloride Polymyxin Broth Base 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.312-20 ng/mL 木瓜特定基因序列(Papaya)核酸檢測試劑盒
31.2-2000 pg/mL 人血管動蛋白樣1(AMOTL-1)ELISA試劑盒
堿性蛋白胨水管（10ml） 英文名稱：Alkaline peptone water 產(chǎn)品規(guī)格：10ml*20
3%過氧化氫試劑 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：2ml*20支
水楊苷發(fā)酵管 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：20支
BPLS瓊脂 英文名稱：BPLS Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
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