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      當前位置:首頁產品中心科研細胞細胞系HMY-1(黑色素瘤細胞)
      HMY-1(黑色素瘤細胞)

      產品簡介

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      產品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-27
      廠商性質:經銷商
      訪問量:598
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      品牌其他品牌貨號GOY-01X0670
      規格1×10?cells/T25培養瓶供貨周期現貨
      主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

      產品介紹:

      名稱    HMY-1(黑色素瘤細胞)

      種屬人類

      年齡(性別)男性,62

      組織來源未知

      生長特性貼壁細胞

      細胞形態成纖維細胞樣

      背景描述established from metastasised lymph node. Pigments were observed at early stages but faded later when established as a cell line.

      生長培養基DMEM10% FBS1% P/S

      推薦傳代比例1:2-1:3

      推薦換液頻率2~3/

      凍存條件

      凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

      公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。

      產品名稱

      HMY-1(黑色素瘤細胞)

      規格

      1×10?cells/T25培養瓶

      貨號

      GOY-01X0670

      細胞特點及處理:

      產品特點:

      1、 使用方便:不需昂貴設備。

      2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。

      3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。

      4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。

      5、 含蛋白穩定劑,提取的蛋白穩定。

      6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。

      7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。

      8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。

      細胞處理:

      1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

      2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

      對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

      1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

      2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

      3.6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

      4.將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

      QQ截圖20210907103850.png

       

      細胞培養技巧:

      一、凍存時的注意事項:

      1. 在冷凍保存之前,應觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %最佳

      2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質,例如是否有雜細胞或者支原體等。

      3. 使用的DMSO 應為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應為試劑級等級,以高壓蒸汽

      滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。

      4. 冷凍保存的細胞濃度:

      4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml

      4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。

      4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml

      4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml

      5. 冷凍保護劑濃度為5 %10 DMSO,若是不確定細胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應作一個backup culture,以防止冷凍失敗。

       

      使用方法:

      收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

      1. 取出25cm2培養瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩定細胞狀態。

      2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。

      3. 細胞傳代

      1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;

      2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養液終止消化;

      3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養基至5mL,放入37℃5% CO2細胞培養箱中培養;

      4) 待細胞*貼壁后,培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

       

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