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      產(chǎn)品中心

      當前位置:首頁產(chǎn)品中心科研細胞原代細胞小鼠精原干細胞
      小鼠精原干細胞

      產(chǎn)品簡介

      小鼠精原干細胞的相關*:大量真/酵母細胞基因組DNA純化試劑盒 10次
      裂解液IX:真/酵母細胞裂解液 50次
      裂解液IX:真/酵母細胞強裂解液 20次
      真/酵母細胞可溶性總蛋白制備試劑盒 20次
      真/酵母細胞可溶性總核蛋白制備試劑盒 20次
      真/酵母細胞漿可溶性總蛋白制備試劑盒 20次

      產(chǎn)品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-27
      廠商性質:經(jīng)銷商
      訪問量:308
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      品牌其他品牌貨號GOY-01X1173
      規(guī)格5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶供貨周期現(xiàn)貨
      主要用途產(chǎn)品僅供科研使用應用領域化工

      產(chǎn)品屬性: 

      產(chǎn)品名稱

      規(guī)格

      貨號

      小鼠精原干細胞

      5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

      GOY-01X1173

      商品介紹:

      名稱    小鼠精原干細胞 

      2.組織來源:睪丸組織

      3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

      4.細胞簡介:

      小鼠精原干細胞分離自睪丸組織;精原干細胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內(nèi)的一群生精干細胞,是成體內(nèi)的定向干細胞。精原干細胞的一些*優(yōu)勢使其成為動物轉基因的理想宿主細胞。精原干細胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項生命活動的調節(jié)機制的深入研究,發(fā)生機理的進一步闡明以及精原干細胞轉染,異體、異種移植技術的實際應用,都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化,以期得到較高產(chǎn)量和純度的有活力的精原細胞用于體外培養(yǎng)。在哺乳動睪丸內(nèi),發(fā)生時一個受高度調控和持續(xù)的過程,精原干細胞(SSCs)一方面進行自我更新維持干細胞數(shù)量,另一方面又不斷執(zhí)行分化成各級生精細胞直至最后生成。精原干細胞定居在曲精細管上皮的基膜處,是哺乳動物發(fā)生的最原始細胞,也是動物體內(nèi)一起能將遺傳信息傳遞的干細胞。精原干細胞體外培養(yǎng)體系的建立,在生物學、醫(yī)學、畜牧業(yè)及制備轉基因動物等領域具有廣闊的應用前景。精原干細胞(SSCs)是生精上皮近基底膜的一群細胞,具有自我更新能力和多向分化潛能,是哺乳動物體內(nèi)能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細胞。

      5.方法簡介:

      實驗室分離的小鼠精原干細胞采用先機械吹打、后胰蛋白酶消化,結合Percoll密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

      6.質量檢測:

      實驗室分離的小鼠精原干細胞經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

      7.培養(yǎng)信息:

      培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

      產(chǎn)品貨號CM-M160

      換液頻率每2-3天換液一次

      生長特性懸浮

      細胞形態(tài)球形

      傳代特性可傳2-3代左右

      消化液0.25%胰蛋白酶

      培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO2,5%

      冷凍保存細胞之方法?

      冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

      冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

      88.jpg

      實驗要點及說明:

      1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

      2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

      4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

      5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      實驗報告:

      一、分離與培養(yǎng):

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

      5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

      二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

      2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

      5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

       Integrin beta1 轉錄變體1A 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

       KIT 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽

      食蟹猴 BTLA 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽

       Integrin beta1 轉錄變體1A 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽

       RAC1 / MIG5 轉錄變體Rac1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽

      小鼠 IL2RB / CD122 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽

       MAP3K8 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽

       GDF-15 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

       VASN 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽

       DIXDC1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

      小鼠精原干細胞組織相容性復合體α抗體Human SEC5/EXOC2 ELISA Kit相關抗體流式組化 XR0280R(抗大鼠)

      肝生長因子激活抑制蛋白2抗體Human SEC61alpha ELISA Kitsrc原癌基因抗體流式組化

      HOMER2抗體Human SDR42E1 ELISA KitL-天冬二甲酯鹽酸鹽

      瘤病調控因子1抗體(鋅指蛋白395)Human SDCCAG8 ELISA KitBOC-L-天冬

      人類狀瘤病18 E6單克隆抗體Human SCN4B ELISA Kit胰凝乳蛋白(牛)

      異質核糖核蛋白F抗體Human SDCCAG10 ELISA Kit卵白素(雞蛋)

      異質核糖核蛋白K抗體Human SCNM1 ELISA Kit透明質酸鈉

      異質核糖核蛋白L抗體Human SCNN1A ELISA Kit鈉

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