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      當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞小鼠棕色脂肪細胞
      小鼠棕色脂肪細胞

      產品簡介

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      產品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-28
      廠商性質:經銷商
      訪問量:390
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      品牌其他品牌貨號GOY-01X1311
      規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
      主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

      冷凍保存細胞之方法?

      冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

      冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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      產品屬性:   

      產品名稱

      規格

      貨號

      小鼠棕色脂肪細胞

      5×10?Cells/T25培養瓶

      GOY-01X1311

      商品介紹:

      名稱    小鼠棕色脂肪細胞   

      2.組織來源:脂肪組織

      3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

      4.細胞簡介:

      小鼠棕色脂肪細胞分離自棕色脂肪組織;動物體內存在棕色和白色兩種脂肪,白色脂肪堆積在皮下,負責儲存多余熱量;棕色脂肪負責分解引發肥胖的白色脂肪,將后者轉化成二氧化碳、水和熱量,本身不儲存熱量。棕色脂肪組織呈棕色,其特點是組織中有豐富的毛細血管,脂肪細胞內散著許多小脂滴,線粒體大而豐富,核圓形,位于細胞中央,這種脂肪細胞也稱為多泡脂肪細胞。棕色脂肪組織在成年動物極少,新生兒及冬眠動物較多,在新生兒主要分布在肩胛間區、腋窩及頸后部等處。棕色脂肪組織僅在嬰兒時期發揮作用,它們堆積在新生兒肩胛處,幫助維持體溫。隨著年齡增長,棕色脂肪會逐漸消失。最終,動物體內只殘存少量棕色脂肪細胞,分布于頸部和鎖骨。脂肪細胞分為白色脂肪細胞和褐色(棕色)脂肪細胞,常呈白色,在嬰幼兒期大量增殖,到青春期數量達到,此后數量一般不再增加。細胞內含有大量富含脂肪的小泡,稱為脂質泡,富含光面內質網。此外,還有一種褐色脂肪細胞,在動物體內主要存在于肩胛骨間、頸背部、腋窩、縱隔及腎臟周圍,含有高度團縮的褐色脂肪,作用是將脂質分解產熱,調節體內脂質比例。

      5.方法簡介:

      實驗室分離的小鼠棕色脂肪細胞采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

      6.質量檢測:

      實驗室分離的小鼠棕色脂肪細胞經油紅O染色檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

      7.培養信息:

      培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

      產品貨號CM-M213

      換液頻率每2-3天換液一次

      生長特性貼壁

      細胞形態梭形、多角形

      傳代特性屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

      消化液0.25%胰蛋白酶

      培養條件氣相:空氣,95%CO25%

       

      實驗要點及說明:

      1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

      2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

      4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

      5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      實驗報告:

      一、分離與培養:

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

      5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

      二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

      2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

      5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

      小鼠 TALLA-1 / TSPAN7 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       EDEM2 / C20orf31 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       TALLA-1 / TSPAN7 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       MMGT1 / EMC5 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       SEZ6L2 / PSK-1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       DNASE1 / Deoxyribonuclease I / DNL1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       TMED4 / ERS25 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       DCBLD2 / ESDN / CLCP1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       DBH / Dopamine beta-Hydroxylase 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

       BPIFB1 / LPLUNC1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

      小鼠棕色脂肪細胞 AR,99.0%4-溴-2-三氟酚 99%Anti-IGF II/IGF2  胰島素樣生長因子-II抗體

      SP4-芐氧基-3-氯苯酸 98%Anti-IMP3/IGF-IIBP3  胰島素樣生長因子2 mRNA 結合蛋白3抗體

      99.98%,powder,粒徑:10±5μm5-基-2-氟苯酸 97%Anti-IGSF8/CD316  球蛋超家族成員8抗體

      99.99%,granular4-羧基苯酸 97%Anti-IKK alpha  KB抑制蛋白激α抗體

      水質鎘標樣 0.1mg/l,分析標準品 2-氯-4-氟苯酸 98%Anti-IKK beta  KB抑制蛋白激β抗體

      AR,powder,粒徑:10±5μm2-羧基苯酸 97%Anti-IKK gamma   KB抑制蛋白激γ抗體

      99.999%,granular2-氯-4-茴香酸 95%Anti-IKB beta  核因子κB抑制蛋白β抗體

      2--6-甲基吡 98%5-氯-2-氟苯酸 97%Anti-phospho-IkB beta (Ser23)  化KB抑制蛋白β抗體

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