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      當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞食管平滑肌細胞
      食管平滑肌細胞

      產品簡介

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      產品廠地:上海市
      更新時間:2025-02-28
      廠商性質:經銷商
      訪問量:384
      詳細介紹在線留言
      品牌其他品牌貨號GOY-01X0809
      規格5×10?Cells/T25培養瓶供貨周期現貨
      主要用途產品僅供科研使用應用領域化工

      實驗要點及說明:

      1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

      2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

      3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

      4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

      5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

      產品屬性:  

      產品名稱

      規格

      貨號

      食管平滑肌細胞

      5×10?Cells/T25培養瓶

      GOY-01X0809

      商品介紹:

      名稱    食管平滑肌細胞  

      2.組織來源:食管組織

      3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

      4.細胞簡介:

      食管平滑肌細胞分離自食管組織;食管可分為頸段、胸段和腹段,脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內,胸段通過膈孔與腹腔內腹相連,腹段很短與胃相連。哺乳動物的食管結構上由內向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,肌層上1/3段為骨骼肌,下1/3為平滑肌,中段為骨骼肌和平滑肌混合組成。其中,肌纖維的排列方式分為內環形和外縱形兩層。食管的蠕動是由食管平滑肌收縮嚴格控制,食管還有括約肌,位于環狀軟骨水平的,稱為食管上括約肌;位于食管下端,一部分在膈上,穿過膈孔,另一部分在膈下的高壓帶,稱為食管下括約肌。食管平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。

      5.方法簡介:

      實驗室分離的人食管平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

      6.質量檢測:

      實驗室分離的人食管平滑肌細胞α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

      7.培養信息:

      培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

      產品貨號CM-H032

      換液頻率每2-3天換液一次

      生長特性貼壁

      細胞形態成纖維細胞樣

      傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態最佳

      消化液0.25%胰蛋白酶

      培養條件氣相:空氣,95%CO25%

      冷凍保存細胞之方法?

      冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

      冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

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      實驗報告:

      一、分離與培養:

      1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

      2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

      3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

      4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

      5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

      二、免疫熒光鑒定:

      1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

      2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

      3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

      4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

      5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

      6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

      小鼠 ITGA2B 基因全長ORF克隆

      小鼠 IL23R 基因全長ORF克隆

      小鼠 IL15RA 基因全長ORF克隆

      小鼠 IgG3-Fc 基因ORF克隆 (非全長)

      小鼠 IgG2b-Fc 基因ORF克隆 (非全長)

      小鼠 IgG2a-Fc 基因ORF克隆 (非全長)

      小鼠 IL12B 基因全長ORF克隆

      小鼠 IL12A 轉錄變體1 基因全長ORF克隆

      小鼠 FAU 基因全長ORF克隆

      小鼠 MT-CO2 基因全長ORF克隆

      食管平滑肌細胞31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Interferon gamma

      0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Collagen alpha-1(XXVII) chain

      78-5000 pg/mL 人ABO組織血型系統轉移(BGAT)ELISA試劑盒

      0.156-10 ng/mL 人鏈接斑珠蛋白(Junction plakoglobin)ELISA試劑盒

      0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Complement C1q subcomponent subunit A

      0.312-20 ng/mL 人固醇調節元件結合蛋白2(SREBP-2)ELISA試劑盒

      1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Human Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 8

      0.156-10 nmol/mL ELISA Kit for Human Myocardin

      0.312-20 ug/mL 人巨噬唾液酸蛋白(Macrosialin)ELISA試劑盒

      M-腸道菌瓊脂 英文名稱:M-Enterococcus Agar 產品規格:250g

       


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