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      共價結合型果膠(CSP)含量測試盒微量法

      產品簡介

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      產品廠地:上海市
      更新時間:2025-03-04
      廠商性質:經銷商
      訪問量:391
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      品牌其他品牌貨號GOY-SH187
      規格100管/48樣供貨周期現貨
      主要用途僅供科研研究實驗應用領域生物產業
      檢測方法微量法產品類別光合作用系列
      品牌谷研貨期現貨

      正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定

      商品屬性:

      產品名稱

      共價結合型果膠(CSP)含量測試盒微量法

      規格

      100管/48樣

      檢測方法

      微量法

      貨號

      GOY-SH187

      產品分類

      光合作用系列

      用途

      僅供科研實驗


      共價結合型果膠(CSP)含量測試盒微量法

      測定意義:

      果膠是構成細胞初生壁和中膠層的主要成分,主要由原果膠、果膠酸甲酯和果膠酸組成。果膠中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等,是許多高等植物細胞壁中含量豐富的多糖成分,其的物理、化學性質影響著植物源食品的口感和品質。果膠間以Ca2+橋及其他離子鍵、氫鍵、糖苷鍵、酯鍵和苯環偶聯的方式交聯,通過不同的抽提方法可以提取各種形式的果膠,如水溶性果膠(WSP)、離子結合型果膠(ISP)和共價結合果膠(CSP)。

      測定原理:

      利用帶有螯合劑的堿溶液提取共價結合型果膠(CSP),采用咔唑比色法測定果膠含量。果膠水解成半乳糖醛酸,在硫酸溶液中與咔唑試劑進行縮合反應,生成物質在530 nm處有最大吸收峰。

      需自備的儀器和用品:

      可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、80%乙醇、丙酮、濃硫酸(不允許快遞)、研缽和蒸餾水。

      試劑的組成和配制:

      提取液一:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。

      提取液二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。

      試劑一:粉劑×1 瓶,-20℃保存;

      試劑二:液體 25mL×1 瓶,4℃保存;

      試劑三:液體 14μL×1 支,4℃保存;

      組織樣本的前處理:

      ①總 GAPDH 酶提取:建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測定。

      ②胞漿和葉綠體 GAPDH 酶的分離:按照植物組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一),冰浴勻漿后于 4℃,200g 離心 5min,棄沉淀,取上清在4℃,8000g 離心 10min,取上清用于測定胞漿 GAPDH 酶活性,取沉淀加 1mL 提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測定葉綠體中 GAPDH 酶活性。

      建議測定總 GAPDH 酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的GAPDH,則按照步驟②提取粗酶液。細菌或培養細胞的前處理先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

      測定步驟:

      1、 分光光度計預熱 30min 以上,調節波長至 340nm,蒸餾水調零。

      2、 樣本測定

      (1)工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,充分溶解,37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)預熱 10 分鐘;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

      (2)在試劑三中加入 500μL 蒸餾水,充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

      (3)在 1mL 石英比色皿中加入 30μL 樣本、20μL 試劑三和 950μL 工作液,混勻,加入最后一個試劑的同時開始計時,記錄 340nm 處 20s 時的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值

      A2,計算 ΔA=A1-A2。

      GAPDH 活性計算

      (1)按樣本蛋白濃度計算

      單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1072×ΔA÷Cpr

      (2)按樣本鮮重計算

      單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min /g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=1072×ΔA÷W

      (3)按細菌或細胞密度計算

      單位的定義:每一萬個細菌或細胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2.144×ΔAV 反總:反應體系總體積,1×10-3L;ε:NADH 摩爾消光系數,6.22×103L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.03 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細菌或細胞總數,500 萬。

      生化檢測試劑盒實驗操作說明:

      一、抗氧化系列生化檢測試劑盒

      包括氧化酶(XO)活性分析、超氧陰離子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性(GOD)檢測、總抗氧化能力(TAC)檢測、植物原花青素(OPC)含量檢測、植物類黃酮含量檢測、植物總酚(TP)含量檢測試劑盒。

      氧化酶(XO)活性分析試劑盒為例,提供了一種簡單易用的比色分析法,用于測定各種樣品中的XO活性,特點是測定血清,血漿,組織/細胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性,以及廣泛的檢測范圍:15.6 -500 mU/mL。

      二、氧化系列生化檢測試劑盒

      包括過氧化氫酶 (CAT) 活性分析、過氧化氫(H2O2)檢測、脂質過氧化(丙二醛) 分析、蛋白質羰基含量檢測、超氧陰離子含量檢測等試劑盒。

      蛋白質羰基含量檢測試劑盒(比色法)為例,提供了一種簡單易用的比色法,用于分析不同生物樣品(細胞/組織裂解液,生物液體)中蛋白質羰基含量。在370 nm處有特征吸收峰。

      特點是:1.測定組織樣本、細胞、細菌、血清等中的蛋白質羰基含量。2.樣本處理、實驗步驟以及結果計算更加詳盡準確精煉。3.保質期長。


      共價結合型果膠(CSP)含量測試盒微量法


      三、抗逆系列生化檢測試劑盒

      包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測、羥自由基清除能力分析、多酚氧化酶(PPO)活性檢測、過氧化物酶(POD)活性檢測等試劑盒。

      超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測試劑盒為例,提供一種簡單易用的比色測定法,用于定量測定血清,血漿,組織/細胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性。

      特點是:1.測定血清,血漿,組織/細胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性。2.通過WST-8法測定SOD活性,zui大抑制率可接近100%,不受一些常見干擾因素的干擾。3.廣泛的檢測范圍:3.13- 200U/mL。

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